����͵Ѵ��������Դ�ҡ�Ԥ����������� DNA �ҡ����������Ҵ��¡ѹ ���Ͷ����������������ͧ��� (���¡������Һ�ҹ ���� host cell) ���Ƿ�����Դ����ʴ��͡�ͧ DNA ���������� �� DNA ����������������� 2 ��ǹ ��� DNA ������·���ͧ�������Դ����ʴ��͡ ��� DNA ���� (vector DNA) ��������ª�Դ �� �����Դ�ͧẤ������ DNA ���� RNA �ͧ����� �������������ͧ�٤����͵ DNA ���Шз�˹�ҷ��� DNA �������������������Һ�ҹ ��Ъ�������Դ����͡Ẻ �ʹ���� ���������
㹡������� DNA 2 ��ǹ��Ҵ��¡ѹ ����������� 2 ��Դ ��� ����Ѵ����� (restriction endonuclease) ��觷�˹�ҷ��Ѵ�ѹ�п�����������ͧ����ͷ����˹觨���Тͧ�������Ъ�Դ (�Ҿ��� 4.2) ����������� ��觷�˹�ҷ�����������Դ�ѹ�п�����������ͧ DNA ������¡Ѻ DNA ���� (�Ҿ��� 4.3)
�ի����� ����Ԥ�����������ҳ��þѹ�ء�����¹͡���� (�Ҿ��� 4.6) �����¹Ẻ��кǹ��è��ͧ DNA ��������
�����������ҳ DNA 㹡�кǹ��þի����� ���� 3 ��鹵���
����á ��� denature �繡����������٧�¡��� DNA ����� 2 ����͡�ҡ�ѹ
��鹷���ͧ��� annealing �繡��Ŵ�س�����ŧ�������������������СѺ DNA �����������ͷӡ���ѧ������ DNA �������㹢�鹵���
����ش���� ��� extension �繡��������������������ʷ�跹��ͤ�������� ������ҨҡẤ�����¨ҡ���������� Thermococcus litorali.... �ӹ�Ǥ����䷴���������� DNA �������� �����ѧ��������� DNA ������� ������ͺ�ͧ��÷Ӿի����� ���� DNA ��������� 2 ��� �ѧ�������ͷӾի�����������Ժ�ͺ �֧� � DNA ����������繨ӹǹ�ҡ������ҹ���š��
�ͺ��� 1
�ͺ��� 2
�Ҿ��� 4.6 ��÷��Ԥ�ի�����������������ҳ DNA��¹͡����
�Ӷ�� :
�����������ҳ DNA ���Ը� PCR ��ҧ�ҡ�Ź������ҧ��
�����Ť����ի�� �繡���¡��þѹ�ء��������õչ��������俿���繵�Ƿ�������š����������㹪����� ���š�ŷ���ջ�Ш������ѹ�������Ǵ����ᵡ��ҧ�ѹ �����š�ŷ���բ�Ҵ�˭���з� ������������ҡ������š�ŷ���բ�Ҵ����������š�ŷ���ٻ��ҧ����ǡ��� �� DNA ����չ��˹ѡ���š����ҡѹ DNA ����繫��������������������ǡ��� DNA �������鹵ç ��� DNA �������鹵ç���ѧ������������ǡ��� DNA �����ǧ��ǹ���� (relaxed circular DNA)
��÷������Ť����ի�������¡ DNA (�Ҿ��� 4.7) ����������������鹷���ժ�Դ��Т�Ҵ�ͧ�پ�ع�������������� �ҡ������ DNA ŧ仴�ҹ���ͧ������ ���ǹ������������� �ҡ����Դ�����俿�� DNA ���Ъ�鹨��������ҡ��Ш�ź��ѧ��Шغǡ ���¤������Ƿ���ҧ�ѹ (��鹡Ѻ��Ҵ����ٻ��ҧ�ͧ�����) ����ͻԴ�����俿�� ��������š�Ţͧ DNA ���Ъ�� ��������˹觵�ҧ�ѹ㹪����� �ҡ��鹹Ӫ����������������������������� ���ǹ����ͧ�����ʧ��ŵ�������ŵ �����ᶺ DNA ��Ҵ��ҧ� ������������������Ѻ�Ѻ DNA �����ͧ�ʧ ������ͧ�����Ѵਹ
��÷����Ť����ի�� ���������ö�к������ DNA ���Ъ���բ�Ҵ���� ����º�Ѻ���š�� DNA ����Һ��Ҵ (DNA marker)
�Ҿ��� 4.7 ��÷������Ť����ի���¡��Ҵ DNA
�Ӷ�� :
���ä�ͻѨ����Ӥѭ��������¡ DNA �͡�ҡ�ѹ������Ը������Ť����ի��
���Ԥ����ͧ����¡�÷������Ť����ի���ҡ� ����������þѹ�ء��������õչ�ҡ������ ���ѧ������ù ���͵�Ǩ�ͺ�����þѹ�ء��������õչ����ͧ��÷�Һ����繻������ 㹡�õ�Ǩ�ͺ DNA ������¡�èѺ�ѹ�ͧ�������ҧ DNA ����ͧ��÷�Һ �Ѻ�ʺ���� DNA ���� RNA �ͧ��ǵ�Ǩ�ͺ (probe) ����բ�Ҵ���� ��з�Һ�ӴѺ������ (��ǵ�Ǩ�ͺ�еԴ��ҡ����ѹ��ѧ�� ����������ͧ�ʧ�����
���������ͧ������������������硫�����Һ㹢�鹵�ش����)
�� �ҡ��ͧ��÷�Һ��� DNA ���˹�����չ A ������� ��ӵ�ǵ�Ǩ�ͺ������չ A (���� mRNA �ͧ�չ A) �Ѻ DNA ��鹹�� �ҷ����������Ҿ���������ǡ� ���Ƿӡ���κ��䴫� ������ DNA �������ǨѺ DNA ���� RNA �ա���˹�觷���繵�ǵ�Ǩ�ͺ �ҡ��鹵�Ǩ������������硫�����Һ (���¡�Ԥ����ô��͡�ÿ� ; autoradiography) �ҡ��ҡ�ᶺ�մӢ��
�ʴ���ҵ�ǵ�Ǩ�ͺ����ö�Ѻ�Ѻ DNA ��鹹���� DNA ��鹴ѧ����Ǩ֧��Ҩ����չ A ��÷��κ���૪ѹ���͵�Ǩ�� DNA �ѡɳй�����¡��� �ҷ����칺�ͷ�κ���૪ѹ (�Ҿ��� 4.8)
�Ҿ��� 4.8 ��÷��ҷ����칺�ͷ�κ���૪ѹ (Southern Blot Hybridization)
�Ӷ�� :
�Ԥ��͵�������κ���૪ѹ ����ѡ��èѺ�ѹ�ͧ�ʤ���� �ҡ����������������ö����ء����Ѻ�������ҧ �͡�˹�ͨҡ��èѺ��� DNA ���¡ѹ
�Ѩ�غѹ��� �ա������¾���� DNA �ͧ�� 㹡�þ��٨���������ѹ�������ҧ ��� ��� �١ ����֧����Ѻ�ô� ��о��٨����ѡ�ҹ�ҧ�Ҫ�ҡ��� ����ѧ����¾���� DNA 㹡�ú͡�͡�ѡɳ�ͧ�ת ����ѵ�����ɰ�Ԩ ����ѧ��㹡�þ��٨���������ѹ��ҧ��Ҿѹ���������Ѳ�ҡ�âͧ�ѵ����оת����
��¾���� DNA ����ӴѺ�ʷ�����͡�ѡɳ������ժ��Ե���е�ǵ� ���ͺؤ�� �Ըյ�Ǩ����¾���� DNA
�����»������� RFLP (Restriction Fragment Length Polymorphism), RAPD (Rapid Amplified Polymorphic DNA), minisatellite DNA ��� microsatellite DNA �繵� �Ըյ�Ǩ��¾���� DNA Ẻ RFLP (�Ҿ��� 4.9) ����ö���кؤ���ᵡ��ҧ���ͤ��������ͧ DNA �ҡ���������� ��������Ѵ����еѴ����ͨҡ��� 2 ���� (������������) ���ǹ��ҷ������Ť����ի�� ��ʹ����ҷ����칺�ͷ�κ���૪ѹ �ҡ��鹵�Ǩ�� �����º��º�ٻẺ�ͧᶺ DNA ����Դ�������������͵�ҧ�ѹ���ҧ�� �Ըա�ù������ö���Ǩ�Ҽ���ͧʧ��·���зӼԴ�� ���纵�����ҧ DNA �ҡʶҹ����Դ�˵��ҵ�Ǩ���º��º�Ѻ DNA �ͧ����ͧʧ����¡��������ʹ
��¾���� DNA �ҡ��÷� RFLP �ͧ����ժ��Ե��Դ��ҧ� ����ö�觺͡�͡�ѡɳ�ͧ����ժ��Ե���Ъ�Դ�� �ҡ�ٻẺ�ͧᶺ����ҡ�
�Ҿ��� 4.9 ��õ�Ǩ��¾���� DNA �����Ը� RFLP
�Ӷ�� :
��ҹ��Һ������㹻Ѩ�غѹ���Ԥ㴷����㹡�õ�Ǩ��¾���� DNA �͡�˹�ͨҡ RFLP